
一、研究背景
藥物研發是一個耗時、耗力且高風險的過程,其中藥物篩選作為早期核心環節,直接決定了后續研發的方向與效率。高通量篩選技術通過對大規模化合物庫進行快速、平行的生物活性檢測,顯著縮短了藥物發現的周期,已成為現代藥物研發的主流技術手段。液體處理作為高通量篩選的核心操作單元,其精度與效率直接影響篩選結果的可靠性與實驗進程的推進速度。
二、材料與方法
(一)實驗材料
1、儀器:博清生物單道移液器、常規品牌單道移液器、自動化液體處理工作站、電子分析天平、酶標儀、96孔細胞培養板、384孔檢測板。
2、試劑:牛血清白蛋白、磷酸緩沖鹽溶液、辣根過氧化物酶、3,3',5,5'-四甲基聯苯胺、鹽酸、臨床候選藥物化合物庫。
(二)實驗方法
1、移液精度與重復性檢測
精度檢測:分別采用博清生物單道移液器與常規移液器,在1μL、10μL、100μL、1000μL四個典型量程下,吸取PBS溶液并轉移至預先稱重的離心管中,通過電子分析天平稱重,根據溶液密度(1g/mL)計算實際移液體積。每個量程重復移液20次,計算平均體積、絕對誤差與相對誤差。
重復性檢測:針對上述四個量程,每個量程重復移液30次,計算每次移液體積的變異系數(CV),CV=(標準差/平均體積)×100%,以此評估移液器的重復性。
2、高通量操作效率對比
以96孔板加樣為模型,分別使用博清生物單道移液器、常規移液器進行藥物樣品加樣操作,每個孔加樣體積為50μL,記錄完成整板加樣所需的時間。每種移液器重復操作10次,計算平均操作時間并進行對比。
同時,統計兩種移液器在連續2小時高通量操作后,操作人員的手部疲勞反饋。
3、兼容性測試
耗材兼容性:使用博清生物單道移液器分別對96孔板、384孔板進行不同體積的移液操作,觀察移液過程中是否出現漏液、掛壁、液體飛濺等現象,同時檢測移液體積的準確性。
試劑兼容性:選取BSA溶液、HRP酶液等常用篩選試劑,使用博清生物單道移液器進行移液后,通過酶標儀檢測試劑活性變化,評估移液器對試劑穩定性的影響。
4、酶抑制活性篩選模型應用實驗
實驗設計:以HRP催化TMB氧化為反應體系,將100種候選藥物化合物作為抑制劑,設置陽性對照(已知HRP抑制劑)、陰性對照(PBS溶液)及空白對照(無酶液),每組設置3個復孔。
操作過程:使用博清生物單道移液器依次向96孔板中加入50μL HRP酶液、20μL藥物化合物溶液,37℃孵育10min后,加入100μL TMB底物溶液,繼續孵育5min,最后加入50μL 2mol/L鹽酸終止反應。
檢測與分析:通過酶標儀檢測450nm波長下的吸光度值,計算各化合物對HRP的抑制率,對比博清生物單道移液器與自動化工作站的篩選結果一致性,評估其在真實篩選場景中的可靠性。
三、結果與分析
(一)移液精度與重復性結果
兩種移液器在不同量程下的移液精度與重復性檢測。在1μL低量程下,博清生物單道移液器的相對誤差為1.8%,CV值為1.4%;常規移液器的相對誤差為3.5%,CV值為2.8%。在10μL、100μL、1000μL量程下,博清生物單道移液器的相對誤差均低于1.5%,CV值均小于1.2%;而常規移液器的相對誤差在2.0%-2.8%之間,CV值在1.8%-2.5%之間。結果表明,博清生物單道移液器在全量程范圍內均展現出更優異的移液精度與重復性,尤其在低量程微量移液場景下,優勢更為顯著。這得益于其采用的新型活塞密封結構,能夠有效減少液體殘留與移液過程中的體積波動,確保微量液體轉移的準確性。
(二)高通量操作效率對比結果
在96孔板加樣效率測試中,博清生物單道移液器完成整板加樣的平均時間為4.2min,常規移液器的平均時間為6.0min,前者效率較后者提升約30%。在連續2小時操作后的疲勞感評分中,使用博清生物單道移液器的操作人員平均評分為2.1分,而使用常規移液器的評分為3.8分。這一結果源于博清生物單道移液器的人體工學設計,其輕量化槍身與舒適握感有效降低了操作人員的手部負荷,減少了長時間操作后的疲勞感,從而提升了高通量篩選中的持續操作效率。
(三)兼容性測試結果
在耗材兼容性方面,博清生物單道移液器對96孔板和384孔板進行不同體積移液時,均未出現漏液、掛壁或液體飛濺現象,移液體積的相對誤差均低于2.0%,表明其與常用高通量篩選耗材具有良好適配性。在試劑兼容性方面,經博清生物單道移液器移液后,BSA溶液的濃度無顯著變化,HRP酶液的活性保留率達98%以上,與常規移液器處理后的試劑穩定性無統計學差異(P>0.05),證實其不會對篩選試劑的性能產生不良影響。
(四)酶抑制活性篩選模型應用結果
在100種候選藥物化合物的篩選中,博清生物單道移液器檢測出8種具有顯著HRP抑制活性的化合物(抑制率≥50%),與自動化液體處理工作站的篩選結果完全一致。陽性對照的抑制率為82.3%±1.5%,陰性對照的抑制率為2.1%±0.3%,各復孔間的CV值均小于2.0%,表明篩選結果具有良好的可靠性與重復性。這一結果充分證明,博清生物單道移液器能夠滿足真實藥物高通量篩選場景對液體處理的嚴苛要求,可作為自動化工作站的經濟替代方案,尤其適用于中小型實驗室的篩選工作。
四、討論
(一)博清生物單道移液器的核心優勢
1、高精度與高重復性:本研究證實,博清生物單道移液器在全量程范圍內均保持優異的移液精度與重復性,尤其是在1μL低量程下,相對誤差仍控制在2%以內,這一性能指標達到了高端手動移液器的水平。其關鍵技術在于采用了進口陶瓷活塞與氟橡膠密封圈,形成了緊密且耐磨的密封系統,有效減少了移液過程中的液體殘留與體積偏差,為微量藥物樣品的準確轉移提供了保障。
2、高效的高通量操作性能:在96孔板加樣測試中,博清生物單道移液器的操作效率較常規移液器提升30%,且操作人員的疲勞感顯著降低。這得益于其優化的按壓力度設計與輕量化槍身,減少了手部肌肉的持續發力,使操作人員能夠在長時間高通量操作中保持穩定的移液狀態,從而提升整體實驗效率。
3、廣泛的兼容性:實驗結果表明,博清生物單道移液器與96孔板、384孔板等常用高通量耗材及各類篩選試劑均具有良好兼容性,無需對現有實驗體系進行調整即可直接應用,降低了實驗室的設備更換成本與操作學習成本。
(二)應用場景與局限性
博清生物科技(南京)有限公司研發的單道移液器憑借其高性價比、高精度與操作靈活性,在中小型科研機構的藥物高通量篩選、酶活性檢測、細胞培養等實驗場景中具有廣闊的應用前景。尤其對于化合物庫規模較小(1000種以下)的初步篩選工作,其能夠以遠低于自動化工作站的成本,實現可靠的液體處理操作。
然而,該移液器也存在一定局限性:在超高通量篩選場景(如384孔板的大規模化合物庫篩選)中,其單道操作模式的效率仍低于8道或12道多通道移液器及自動化工作站;此外,其最大移液量程為1000μL,對于超過1mL的大量液體轉移需求,需多次操作,存在一定不便。
(三)與同類產品的差異化對比
與市場上主流的常規手動移液器相比,博清生物單道移液器在精度、重復性與操作舒適性上形成了顯著差異化優勢;與高端進口手動移液器相比,其價格僅為后者的60%-70%,具有極高的性價比。
本研究通過系統的性能評估與實際應用驗證,明確了博清生物科技(南京)有限公司研發的單道移液器在藥物高通量篩選與分析中的核心優勢。該移液器在0.5-1000μL量程內具有優異的移液精度(相對誤差<2%)與重復性(CV<1.5%),操作效率較常規移液器提升30%以上,且與常用篩選耗材、試劑具有良好兼容性。在酶抑制活性篩選模型中,其篩選結果與自動化液體處理工作站完全一致,充分證明了其在藥物高通量篩選中的可靠性與適用性。
博清生物科技(南京)有限公司研發的單道移液器以其高精度、高效率、高性價比的特點,為藥物篩選與分析工作提供了理想的液體處理工具,尤其適用于中小型科研機構及基層實驗室的高通量篩選需求。未來,可進一步拓展其在細胞水平篩選、高通量測序樣品處理等更多科研場景中的應用,同時期待企業推出多通道版本,以滿足更高效的超高通量篩選需求。
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